Врожденные метаболические расстройства. Лабораторные тесты для дородового отбора и диагностики

Применение

Общие факторы риска:

•  возраст матери >35 лет;
•  Анормальные уровни в сыворотке а-фетопротеина, ЧХГ или несвязанного эстриола.

Этнические факторы риска:

•  серповидно-клеточная анемия (присутствие серповидных эритроцитов; подтверждается с помо­щью электрофореза гемоглобина);
•  болезнь Тея — Сакса (снижение сывороточной гексозаминидазы А);
• а- и (З-талассемия (снижение среднего объема эритроцитов; подтверждается с помощью электро­фореза гемоглобина).

Специфические факторы риска:

• краснуха, токсоплазмоз, ЦМВ;
• болезни матери (например, сахарный диабет, фенилкетонурия);
• действие тератогенов (например, радиация, алкоголь, препараты лития, противосудорожные, изотретиноин);
• предшествовавшие мертворождения или неонатальная смерть;
• предшествовавшие дети с хромосомными аномалиями и другими дефектами;
• врожденные заболевания (например, муковисцидоз, половые рецессивные наследуемые анома­лии, метаболические расстройства);
• любой из родителей с непроявленными рецессивными генными аномалиями.

Пробы материнской сыворотки крови

MaternalSerumSampling

Плодная ДНК в сыворотке матери предсказывает миодистрофию, (3-талассемию, ахондроплазию, трисомию по 21-й паре (синдром Дауна), гемолитическую болезнь, преэклампсию.

Амниоцентез

Amniocentesis

Как правило, не проводят до 14 недель беременности. Риск потери плода примерно 0,5%. Клеточная культура развивается 5-7 дней; аналогична культуре фибробластов.

Применение

Назначают беременным > 35 лет для диагностики хромосомных аномалий.

Алгоритм тестирования беременных посредством анализа уровня АФП (С помощью этого алгоритма выявляются все случаи анэнцефалии и 80% дефекта нервной трубки (ложные результа­ты чрезвычайно редки)

Можно выявить маркеры некоторых врожденных аномалий, особенно нарушения обмена амино­кислот.

Подтвердить анормальные уровни АФП и ЧХГ в материнской сыворотке крови.

Биопсия ворсин хориона

Chorionic Villus Sampling

Как правило, проводится на 10-13-й неделях беременности; реже на 6-7-й неделях.

Риск потери плода < 2%. Невозможность получить результат составляет 2%.

Для точной диагностики по материалу хориона (ДНК, кариотип, ферменты) следует тщательно из­бегать загрязнения пробы тканью матери (децидуальная оболочка).

В некоторых случаях потребуется культура с отсутствием Neisseriagonorrhoeasили вируса простого герпеса.

Ассоциируется с 7% случаев потери плода, аналогичных при амниоцентезе (спонтанная частота — 4,5%).

Ложно-положительный результат в 2% случаев сравним с 0,3% случаев амниоцентеза.

Большая часть пренатальной диагностики дефектов метаболизма ферментов связана именно с этой технологией.

Не исследуется амниотическая жидкость, поэтому метод не используют для диагностики дефекта нервной трубки.

Основное преимущество этого метода в том, что данные бывают получены раньше, чем при исследо­вании амниотической жидкости. Это дает возможность в особых случаях прервать беременность на более ранних сроках, уменьшая риск для матери.

Выявить родителей с рецессивными генами (например, муковисцидоз, болезнь Тея — Сакса). Позволяет выявить сцепленные с Х-хромосомой рецессивные гены (гемофилия, миопатия Дю- шена).

Ненадежен для диагностики синдрома хрупкой Х-хромосомы.

Признаки

Экспертиза хромосомных нарушений

•  80% случаев трисомии по 18-й, 21-й, 13-й парам бесплодны или имеет место мозаицизм, сце­пленный с половыми хромосомами.
• 20% случаев несбалансированные транс локации или делеции или другое.
•  Предыдущий ребенок с трисомией.
• Мать с Х-хромосомой, передающая зависимые заболевания (предопределяет пол плода).
•  Родители с хромосомными транс локациями.
•  Возраст матери > 35 лет.

Проверка ограниченности ферментного цикла

• Гемоглобинопатии (например, талассемия).
• Синдром Леша — Найхана.
•  Дефицит а1-антитрипсина.
•  Фенилкетонурия.

Метаболические пробы

•  Дефицит аденозиндезаминазы.
•  Адренол ейкодистрофия.
•  Аргининянтарная ацидурия.
•  Цитруллинемия.
•  Цистиноз.
•  Болезнь Фабри.
•  Анемия Фанкони.
•  Болезнь Фабера.
•  Болезнь Гоше.
•  Ганг л иози доз GM1.
•  Ганглиозидоз GM2 (болезнь Тея — Сакса).
•  Гомоцистинурия.
•  Болезнь Краббе.
•  Синдром Леша — Найхана.
•  Болезнь кленового сиропа.
•  Синдром Менкеса.
•  Метахроматическая лейкодистрофия. а Метилмалоновая ацидемия.
•  Муколипидоз II типа.
•  Мукополисахаридоз (la, II, 1П, IV типа).
•  Множественный дефицит сульфатазы.
•  Болезнь Неймана — Пика.
•  Болезнь Помпе.
•  Болезнь Волмана.
•  Синдром Зельвегера.

Исследование крови плода

Fetal Blood Sampling

Как правило, исследуется на 15-й неделе, но можно на 18-23-й неделях. Проба на загрязненность сывороткой матери, что может предопределить уровень ЧХГ. Дополнительный риск для плода близок к 2%.

Применение

Пренатальная диагностика

•  Изоиммунизация эритроцитов по резус-фактору, минорными антигенами.
•  Аллоиммунная или аутоиммунная тромбоцитопения.
•  Гемоглобинопатии (например, талассемия, серповидно-клеточная анемия, сфероцитоз).
•  Дефекты коагулопатии (например, гемофилия, болезнь Виллебранда).
•  Иммунодефицитные состояния (например, тяжелый комбинированный иммунодефицит, син­дром Вискотта — Олдрича, синдром Луи-Бар, синдром Чедиака — Хигаси и др.).
•  Внутриутробные инфекции (краснуха, токсоплазмоз, ЦМВ, парвовирус В19) повышают уро­вень IgM, лейкоцитов и эозинофилов, приводят к тромбоцитопении.
•  Хромосомные аномалии (например, мозаицизм, синдром хрупкой Х-хромосомы).
•  Метаболические и цитогенетические заболевания (например, фенилкетонурия, муковисцидоз, миопатия Дюшена).
•  Другие (например, семейная гиперхолестеринемия, адренолейкодистрофия).
•  КОС крови плода и метаболический статус.
•  Исследование крови плода на содержание лекарств.

Биопсия плода

Fetal Biopsy

Применение

Биопсия печени для диагностики дефицита длинноцепочной 3-гидроксиацил-КоА-дегидрогеназы, орнитинкарбамоилтрансферазы, атипичной ФКН, связанной с дефицитом ГГТП, циклогидрола- зы-1, гипероксалурии I типа.

Биопсия кожи для диагностики генетических заболеваний, таких как буллезный эпидермолиз. Биопсия мышц для диагностики миопатии Дюшена.

Исследование мочи плода

Fetal Urine

Применение

В случаях маловодия, когда АЖ нельзя исследовать.

Для диагностики и лечения обструктивных уропатий плода.

Пузырная жидкость

Cystic Hygroma Fluid

Применение

Для диагностики хромосомных аномалий (например, трисомия 18, трисомия 21).

Генетическое тестирование

Genetic Testing

Применение

Выявление носительства (серповидно-клеточная анемия, болезнь Тея Сакса).

Пренатальная диагностика (синдром Дауна).

Отбор новорожденных на массовые исследования (например, фенилкетонурия, гипотиреоз).

УЗИ и эхокардиография

Ultrasound and Echocardiography

Применение

Для начального подбора в группы больных.

Определение внутриутробного возраста.

Кариотип изучать не нужно, если дефект найден при УЗИ (обнаруживает у каждого 3-го плода). Для дородовой диагностики трисомии 21 эффективно УЗИ костей черепа плода (лицевых). В 50% случаев выявляются аномалии сердца и почек, которые не обнаруживаются другими методами.

Аномалии: триплоидия и трисомия по 13,18, 21-й хромосомам, моносомия по Х-хромосоме (45, X). Выявляют около 50% крупных сердца, почек, мочевого пузыря и нарушений, которые не опре­деляются материнской сывороткой скринингом АФП.

Исследование кариотипа

Karyotype Analysis

Применение

Исследование хромосом X, Y, 21, 18, 13.

Молекулярная диагностика 

Molecular Diagnosis

Применение

Прямое обнаружение мутации генов. Исследуются клетки культуры амниона или клетки ворсин хориона. Можно выявить некоторые болезни, хотя продукт аномальных генов не продуциру- ется (например, взрослый поликистоз почек, серповидно-клеточная анемия, талассемия, му- ковисцидоз, болезнь Гоше, миопатия Дюшена, синдром хрупкой Х-хромосомы, дефициты факторов).

Выделение из крови матери клеток плода и фетальной ДНК

Isolation of Fetal Cells in Maternal Blood or Fetal DNA

Содержание клеток плода в крови матери составляет 1:1000—5000.

Применение   

Позволяет применять ПЦР для более тонких генетических тестов, например, как реализуется половой фенотип.