Вирус простого герпеса
Human Herpesviruses (HSY)
Возбудитель — симплексвирус с двунитевой спирализованной ДНК.
Простой герпес
Возбудитель — ВПГ-1 и ВПГ-2, выявляемые соответственно у < 90% и 10-30% популяции ретро спективно. Возбудители могут быть связаны с развитием энцефалита.
- Прямое цитологическое исследование скарификата с места поражения (окраска по Райту — Гимзе) выявляет многоядерные гигантские клетки с внутриядерными включениями (мазок по Тцанку). Кожные везикулы дают положительный мазок в 66% и положительную культуру в 100% случаев; пустулы дают положительный мазок в 50% случаев и положительную вирусную культуру в 70% случаев; покрытые корочкой язвы дают положительный результат мазка в 15% случаев и положительную культуру в 34% случаев. Разрешает быструю диагностику. Не дифференцирует ВПГ-1, ВПГ-2 и вирус ветрянки. Также может быть идентифицирован в рутинном Пап-мазке шейки матки при выявлении мультиядерных клеток, в которых обнаруживаются внутриядерные включения и венчик. Также может использоваться прямая ЭМ. Другие методы, основанные на микроскопии, включают непрямой НИФА и иммунопероксидазный тест. Отрицательный результат не исключает данного диагноза.
- Посев содержимого везикулы или язвы — рекомендуемый метод, и подтверждение его путем окрашивания специфичными моноклональными антителами помогает установить диагноз. Посев при рецидивирующих поздних заболеваниях менее чувствителен.
- Определение антигенов (ИФА или прямая флуоресценция) в клиническом образце (везикула или язвы): дает различение ВПГ-1 и ВПГ-2, более быстрый (1-4 часа) и столь же чувствительный (70-94%) у бессимптомных лиц, как культура, и более чувствительный и специфичный (> 92% ), чем Tzanck-тест или прямая ЭМ.
- ПЦР выявляет ДНК ВПГ в тканях, ЦСЖ или клеточных образцах. Это чувствительный, специфичный и быстрый метод, но может быть коммерчески недоступен.
ТИФА IgM и IgG.
- Серологическая диагностика: ТИФА, иммуноблоттинг или иммуноблот на гликопротеин G могут различать ВПГ-1 (gGl) и ВПГ-2 (gG2). Положительный результат — свидетельство инфицирования; отрицательный указывает на отсутствие предварительного инфицирования. Иммуноблоттинг — золотой стандарт определения антител. Иммуноблот IgG имеет Ч/С > 80% /96%. При первичной инфекции наблюдается сероконверсия или > 4-кратное повышение титра в парных сыворотках.
- При энцефалитах ПЦР ЦСЖ (Ч/С = 98% /> 94%) вытесняется биопсией мозга.
- Для неонатальных инфекций определение антигенов или вирусной культуры buffy coat крови — методы, помогающие установить диагноз. Сероконверсия или повышающиеся титры IgG/IgM менее эффективны. Специфичные антитела класса IgM могут определяться уже во 2-ю неделю инфицирования.
Ветряная оспа (варицелла-зостер; ВВО) и опоясывающий лишай
Chickenpox (Varicella-Zoster; VZV) and Herpes Zoster (Shingles)
Возбудитель первичной инфекции — герпесвирус с двунитевой спирализованной ДНК. Опоясыва- ющий лдшяй развивается вследствие реактивации латентного вируса ветряной оспы в дорсальных корешковых ганглиях.
Лабораторная диагностика обычно не требуется, кроме дифференцировки с оспой.
- ПЦР ДНК дает 88% чувствительности в окрашенном мазке и 97% чувствительности в неокрашенном мазке.
- Световая микроскопия окрашенных по Райту гигантских эпителиальных клеток с внутриядерными включениями в жидкостях организма или содержимого везикулы (Tzanck-мазок) имеет 75% чувствительности. Положительный результат и при простом герпесе. ЭМ показывает схожие частицы в везикальном содержимом.
- Выявление антигенов ВВО путем иммунофлуоресцентного окрашивания материала с участка повреждения диагностично при острой инфекции. Метод чувствительнее, чем культура (в отличие от ВПГ и ЦМВ), особенно на стадии корочек. Позволяет предположить диагноз.
- Выделение ВВО в клеточной культуре содержимого везикулы или скарификата с участка повреждения обычно на 3-5-й день.
- При иммуногистохимической окраске на 4-10-й час болезни визуализируются инфицированные клетки.
- Серодиагностика (например, РСК) в основном замещена вышеперечисленными методами диагностики. Наличие в ЦСЖ — признак, диагностичный для асептических менингитов, вызванных ВВО, даже в отсутствие поражений кожи. Метод латексной агглютинации чувствительный, коммерчески доступный, быстрый и простой в постановке. В сыворотках острой фазы и фазы реконвалесценции 4-кратное повышение титра является подтверждением диагноза.
- Гибридизация in situ может выявить при первичной инфекции вирус ВВО в мононуклеарных клетках периферической крови за 24 часа. У 40% пациентов с опоясывающим лишаем количество клеток повышено (< 300 мононуклеаров/мкл) в ЦСЖ. Культура редко положительна при энцефалитах, вызванных ВПГ, поэтому в данном случае эффективна ПЦР. У 40% пациентов с трансплантатом костного мозга развивается данная инфекция или происходит ее реактивация.
Лейкоциты с абсолютным и относительным лимфоцитозом повышаются после трех суток заболевания.
Функциональные тесты печени незначительно анормальны.