Цитомегаловирусные инфекции

Цитомегаловирусные инфекции

Cytomegalic Virus (CMV) Inclusion Disease

Вирус с двунитевой спирализованной ДНК семейства Herpesviridae.

•  Пожизненная латентная инфекция у менее 40% популяции; клинически проявляется при иммуно­супрессии. Количественное определение ДНК ЦМВ может выявить наличие активной инфекции. Определение мессенджера РНК ЦМВ может указывать на активную, а не латентную инфекцию.
•  Результат исследования БАЛЖ путем вытяжки культуры и анализа моноклональных антител для диагностики интерстициальной пневмонии у иммунокомпрометированных пациентов чув­ствительнее, нежели рутинная цитология, может быть объединен с гибридизцией нуклеиновой кислоты или рутинной клеточной культурой.
•  Заболевание ЖКТ подтверждается биопсией с выявлением типичных включений, иммуноло­гической окраски на антигены ЦМВ или пробой ДНК in situ на ДНК ЦМВ.

Образцы серологии при ВЭБ-инфекции

 Беременность и врожденные инфекции

•  Внутриутробная ЦМВ-инфекция обусловлена инфекцией матери во время беременности и при­водит к ЦМВ-заболеванию 10—15% младенцев к рождению; многие инфицированные новорож­денные умирают, а выжившим, как правило, требуются пожизненное наблюдение и терапия. Фетальная инфекция развивается примерно в 20% случаев (< 2 на 1000 рожденных). К 5-летнему возрасту у 25% развиваются осложнения, например, поражение ЦНС, хориоретинит.
•  Специальные методики с использованием мочи дают достоверные результаты при врожденной ЦМВ-инфекции раньше, чем в других популяциях; в первые 2 недели жизни младенца это наи­более чувствительный и специфичный метод диагностики ЦМВ-инфекции.
•  ПЦР для определения ЦМВ является быстрым, чувствительным и специфичным методом.
•  Антитела класса ЦМВ-IgM (> 1 : 32) обнаруживают примерно у 2/д новорожденных, инфициро­ванных внутриутробно, поэтому наличие их в единственном образце сыворотки диагностично.
•  Внутриядерные включения в эпителиальных клетках осадка мочи и биопсия печени также диа- гностичны, причем тесты эффективнее для младенцев, чем для взрослых.
•  Отрицательный ЦМВ-IgG у матери и ребенка исключает ЦМВ-инфекцию.
•  У новорожденных выделение вируса — более надежный метод, чем определение IgM. Выделение проводят в стандартной клеточной культуре (цитопатические эффекты на 3-7-й день) мочи, слюны или ткани в первые 21 день жизни, и это является золотым стандартом диагностики внутриутроб­ных инфекций. После 21 дня жизни перинатальную инфекцию у младенца исключать нельзя.
•  Вирусная культура амниотической жидкости — чувствительный метод и индикатор внутри­утробной ЦМВ-инфекции.
•  Однослойная культура клеток (см. ниже). Максимальная чувствительность при использовании обеих систем (первичные и перевиваемые) культур.
•  ЦМВ-IgM в реакции ИФА (Ч/С = 69% /94%) или РИО (Ч/С = 89% /100%) в первые 2-3 недели инфекции. Результат подтверждается культурой.
•  ЭМ мочи имеет примерно 66% чувствительности, но не отличает ЦМВ от других герпесвирусов.
•  Микроскопическое исследование ткани мертворожденных младенцев выявляет внутриядерные включения и формации гигантских клеток.
•  Высокие Ч/С дают ПЦР мочи, ЦСЖ, сыворотки крови.
•  У 50% новорожденных развивается гемолитическая анемия с желтухой и у 75% тромбоцито­пения.
•  ЦСЖ в норме, кроме белка > 120 мг/дл в 50% случаев.

 Скрининг и диагностика реципиентов и доноров крови и трансплантатов

•  ЦМВ-инфекция встречается у > 50% пациентов с трансплантатами костного мозга, обычно на 1-3-й месяц, причем цитомегаловирусная пневмония обусловливает выраженную смертность. Серонегативные пациенты должны получать только серонегативные продукты крови, проверен­ные на ЦМВ. Фильтрация для уменьшения количества лейкоцитов до < 106/ед и тромбоцитов предотвращает передачу вируса при трансфузии непроверенной крови.
•  Синдром гетерофильно-отрицательного инфекционного мононуклеоза (возбудитель в 50% случа­ев — ЦМВ) у иммунологически компетентных взрослых характеризуется перечисленными ниже признаками
•  Данные исследования печени и крови, как при гетерофильно-положительном инфекционном мо- нонуклеозе, вызванном ВЭБ.
•  Иммунологические признаки:

повышен титр холодовых агглютининов (как и у гетерофильно-позитивных пациентов);

характерна криоглобулинемия (смешанная IgG-IgM);

повышен РФ (холодреагирующий в большей степени, чем теплореагирующий);

характерен положительный прямой тест Кумбса;

поликлональная гипергаммаглобул инемия;

ложно-положительный результат теста на сифилис в < 3% случаев;

АЯА (крапчатый образец) могут присутствовать транзиторно.

 Серодиагностика у иммунокомпрометированных пациентов неэффективна

•  Латекс-агглютинация для определения антител к ЦМВ является быстрым методом с 98% чув­ствительностью, эффективна для скрининга доноров крови и органов. Отрицательный результат подтверждается ИФА. Около 50% взрослого населения Северной Америки сероположительны на антитела к ЦМВ, а на урбанистических территориях > 80%.
•  ЦМВ-IgM на 10-14-й день после первичной инфекции определяется одноразовым тестом в острой фазе (> 1 : 32); титр =1:16 может персистировать в течение 12 месяцев у 24% пациентов.
•  4-кратное повышение в титрах антител ЦМВ-IgG во 2-4-ю неделю — при первичной инфекции, а при реактивации и реинфекции у взрослых встречается только изредка.

 Подтверждающие тесты на ЦМВ

•  Выделение вируса в стандартной клеточной культуре может занять несколько недель. ЦМВ мо­жет распространяться после первичной инфекции в отсутствие болезни примерно 2 года, поэтому результат следует интерпретировать осторожно.
•  Активная ЦМВ-инфекция достаточно точно диагностируется в однослойной клеточной культуре (shell-vial) с окраской ПФА; возможно выделение вируса в моче, крови, секретах, тканях в пери­од < 48 часов.
•  Определение ЦМВ рр65-антигенемии происходит в течение нескольких часов. Набор методик имеет Ч/С = 83%/89%; лейкоциты периферической крови зачастую положительны у иммуно­компрометированных пациентов и у пациентов с цитомегаловирусным инфекционным монону- клеозом, что указывает на виремию.
•  Идентифицировать цитомегаловирусные тельца или ЦМВ-антигены в вовлеченных тканях (на­пример, БАЛЯС) НИФА удается быстро, но метод менее чувствительный, чем культура.
•  У методов ДНК- и РНК-гибридизации высокие Ч/С.
•  ПЦР позволяет за несколько часов определить вирусную ДНК/РНК в крови, плазме, ЦСЖ, БАЛ Ж.

Лабораторные данные по вовлечению в процесс печени, почек, мозга

•  Энцефалит выявляют у 16% ВИЧ-инфицированных пациентов; 85% пациентов инфицированы ВИЧ

Ч/С ПЦР = 79% /95%;

вирусная культура ЦСЖ обычно отрицательная;

прочие методики включают: выявление антигена рр65 в лейкоцитах ЦСЖ, ДНК ЦМВ в ЦСЖ, ги­бридизация in situ лейкоцитов ЦСЖ, повышенный коэффициент соотношения антитела к ЦМВ: сыворотка.

•  Диссеминированная цитомегаловирусная инфекция развивается у иммуносупрессивных паци­ентов (например, ретинит-индуцированная слепота встречается у 10-45% пациентов со СПИДом).