При определении чувствительности культур, выделенных от больных, к коммерческому препарату лечебного комплексного сальмонеллезного бактериофага производства ДП «Биофаг» НПО «Иммунопрепарат» (г. Уфа) установлено отсутствие его действия на основную часть (более 98%) штаммов S. typhimurium. В связи с этим возникла необходимость адаптации бактериофага к выделенным культурам S. typhimurium, которая была проведена производителем. Применение адаптированного препарата бактериофага продемонстрировало его высокие литические свойства к выделяемым в последующем культурам возбудителя. Фаголизабельность культур оценивалась «+++» и «++++» вне зависимости от исследуемого материала и времени его взятия. Изменения фаголизабельности бактерий не отмечалось в течение всего времени наблюдения за очагом (1,5 года). Фагорезистентных культур выявлено не было.
Исследования, направленные на изучение дополнительных факторов вирулентности штаммов S. typhimurium, выделенных в период хронической эпидемии, показали, что подавляющая часть выделенных госпитальных штаммов — 141 из 152 изученных (92,8%) — обладает антилизоцимной активностью.
При изучении в опытах с праймерами invA гена у госпитальных штаммов S. typhimuriumвыявляется положительная реакция в 90,8% случаев (89 из 98 изученных). Наличие invA гена коррелирует с адгезивной (89,8%) и инвазивной способностью ^ чь ,%) альмонелл и подтверждает сохранение патогенного потенциала возбудителя.
Способность S. typhimuriumпродуцировать IgA-протеазу исследовали с помощью реакции агрегатгемагглютинации (РАГА) и полимеразной цепной реакции. Показано, что музейные эталонные штаммы S. typhimuriumне обладают iga-тентц. Такие гены не обнаружены ни в хромосоме бактерии, ни в ДНК собственной плазми-ды с молекулярной массой 60 МДа.
Госпитальные штаммы дали положительную реакцию на наличие tgfl-генов в 63,6% случаев (49 из 77 изученных штаммов). Указанное свойство у госпитальных штаммов S. typhimuriumвыявлено и описано нами впервые.
В процессе хранения и пересевов культур S. typhimurium, так же как и у многих других видов патогенных бактерий, отмечается утрата вирулентности, связанная с явлением сегрегации генов, определяющих выражение патогенных свойств. Это происходит вне организма хозяина, чувствительного к возбудителю, в связи с чем требуется либо пассирование штаммов через организм чувствительных лабораторных животных, либо хранение культур в лиофильно высушенном состояний. Указанное явление позволяет объяснять способность синтеза IgA-протеазы лишь основной частью госпитальных штаммов S. typhimurium(63,6%), несмотря на однородность их молекулярно-генетических характеристик (95,2%).
Следует подчеркнуть, что сальмонеллы могут быть выделены не только из кала и крови (при бактериемии- 75%) пациентов, но также довольно часто и из других биологических жидкостей организма (25%), в том числе желчи, мокроты, экссудатов грудной и брюшной полостей, гнойного отделяемого ран, промывных вод при бронхоскопии и др.
Серологическая диагностика при ВВС имеет вспомогательное значение, учитывая «фоновые» показатели населения и существенное снижение иммунного статуса пациентов. Подтверждением диагноза целесообразно считать наличие положительной динамики титров к групповому (В) сальмонеллезному О-антигену не менее чем в 4 раза (при отсутствии таковой в отношении антигенов других групп). При отсутствии положительной динамики титров условно-диагностическим считают титр не ниже 1:400.
Важно подчеркнуть высокую устойчивость возбудителя инфекции к действию факторов внешней среды, в том числе дезинфектантов (табл. 10.7). Эта особенность является значимой для характеристики возбудителя, понимания'специфйки динамики проявлений эпидемического процесса и длительности существования эпидемических очагов ВВС.
Оценка чувствительности госпитальных штаммов S. typhimuriumк различным дезинфицирующим препаратам
|
Препарат |
|
Хлорамин |
|
Перекисьводорода |
Септодор (Септодор-форте) |
||||
|
Экспозиция, мин. |
0,5% |
1% |
2% |
3% |
1% |
3% |
5% |
0,05% |
0,1% |
|
10 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
20 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
30 |
+ |
+ |
+ |
— |
+ |
+ |
— |
- |
- |
|
60 *гг __ SL . PL. |
+ |
+ |
- |
12ц |
+ |
- |
- |
" |
- _ |
'Примечание: <+» - наличие роста; «-» - отсутствие роста
Данные табл. 10.7 свидетельствуют о том, что госпитальные штаммы 5. typhimuriumобладают значительной устойчивостью к действию высоких концентраций традиционно используемых дезинфицирующих средств. В практической деятельности получен хороший эффект при использовании препаратов на основе четвертичных аммониевых соединений.
Другим важным свойством возбудителей ВБС является длительная выживаемость на объектах внешней среды. Так, в смывах с предметов больничных палат секторов реанимации через 60-80 дней после окончания регистрации манифестных форм заболеваний обнаруживали 5. typhimuriumс характерными свойствами. Одним из важнейших факторов передачи сальмонелл является палатная пыль, в которой они длительное время сохраняются. Например, при исследовании пыли из труднодоступных мест палатных секций одного из хирургических отделений S. typhimuriumбыла выделена через 127 дней после регистрации последнего заболевшего ВБС в данной палате.
Все эти свойства возбудителя в значительной степени определяют длительность существования эпидемического очага ВБС и сроки его полной ликвидации, подчеркивая роль «госпитальной среды» в его формировании.
Таким образом, очевидно, что госпитальные штаммы сальмонелл (в большей степени S. typhimurium) представляют собой особую биологическую разновидность, характеризующуюся рядом свойств, позволяющих их дифференцировать от обычных штаммов соответствующих сероваров. Они обладают способностью поддерживать внутрибольничные очаги инфекции, характеризующиеся особенностями течения эпидемического процесса в отличие от классической сальмонеллезной инфекции (зооноза). Специфика свойств госпитальных штаммов S. typhimuriumво многом определяет характер и тяжесть течения инфекционного процесса, ведущие пути и факторы передачи инфекции в стационаре для взрослых, длительность и особенности проведения комплекса противоэпидемических мероприятий по ликвидации очагов.